N= 29 ratas Wistar
Peso medio : 421g

Origen de los animales : Biotério Central del Campus de Ribeirão Preto de Universidad de São Paulo
Mantenimiento : Patología Experimental Laboratorio de Patología del Departamento de la Facultad de Medicina de Ribeirão Preto – USP
Conservación de los animales : cajas de polipropileno
Alimentación : dieta básica de laboratorio y agua
Condiciones de luz : ciclos naturales de luz/oscuridad bajo condiciones básicas controladas
Experimentadores : A.Tenenbaum,R.Mené,Kim

Los animales fueron eutanasiados en cámaras de CO2.

• Incisión de la piel con una hoja nº 23
• Localización y aislamiento del músculo pretibial usando tijeras Metzenbaum
• Sección de los tendones con tijeras Mayo.
• Fijación de porciones de los músculos sobre secciones de corcho
• Inclusión usando solución de formaldehído al 50% - 10% tamponado y 50% de parafina pura para estudio microscópico óptico convencional.
• Tinción de secciones como proceso histológico de rutina.
• Micrótomo utilizado : Leika RM 2155
• Coloración de los cortes musculares con

-hematoxilina-eosina
-tricrómico de Masson
-y picro-sirius rojo.

• Examen histológico se realizó con un microscopio convencional (Olympus BH-2).
• Observación con lámpara polarizada
• Documentación fotográfica se realizó con un microscopio Leika DMR unido a una cámara digital Leika CD 300F y PC compatible.

• Los animales fueron divididos en 6 cajas, de modo que las cajas de los números 1 a 5 tenían 5 ratas y la caja número 6 tenía 4 ratas 
• Todos los animales fueron sometidos a una evaluación de la marcha mediante impresión de huellas en papel especial, tras inmersión previa de las patas traseras en una solución jabonosa. 
• Caja 1 tenía el grupo control, que recibió la aplicación de 0,1 ml de solución salina ( NaCl 0,9%) en el músculo pretibial derecho. 

• Los animales de las cajas 2 a 5 recibieron 0,1 ml del producto principal Endopeels Original en el mismo músculo que el grupo control.

• Caja 6 estuvo constituida por 4 ratas, y cada una recibió 0,5 ml del producto principal Endopeels original inyectado en la capa subcutánea. 

• Todos los animales fueron sometidos a la evaluación de la marcha antes y después de sus respectivas inyecciones.

1 mes después de la inyección de Endopeel 0.1ml en el músculo pretibial derecho.
Lo que se ve en negro en las imágenes no es una necrosis como podrían imaginar algunos científicos !
De hecho, deben considerarse 4 conclusiones

• un artefacto de coloración
• ausencia de necrosis
• una apoptosis
• un proceso biorregenerativo 

3 meses (D90) después de la inyección de Endopeel 0.1ml en el músculo pretibial derecho.

7 meses (D210) después de la inyección IM de Endopeel 0.1ml en el músculo pretibial derecho.

Restitutio ad integrum completo después de 7 meses

0.5 ml ( 5x 0.1ml)  Inyección SC de Endopeel en el área subcutánea pretibial derecha.