N= 29 ratos Wistar
Peso médio : 421g

Origem dos animais : Biotério Central do Campus de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo
Manutenção : Patologia Experimental Laboratório de Patologia do Departamento de Medicina da Faculdade de Ribeirão Preto – USP
Hospedagem dos animais : caixas de polipropileno
Alimentação dos animais : dieta básica do laboratório e água
Condições de iluminação : ciclos naturais de claro/escuro sob condições básicas controladas
Experimentadores : A.Tenenbaum,R.Mené,Kim

Os animais foram eutanasiados em câmaras de CO2.

• Incisão da pele com lâmina nº 23
• Identificação e isolamento do músculo pretibial usando tesouras Metzenbaum
• Secção dos tendões com tesoura Mayo.
• Fixação de porções dos músculos em blocos de cortiça
• Inclusão usando solução de formaldeído 50% - 10% tamponada e 50% de parafina pura para estudo microscópico óptico convencional.
• Coloração das lâminas como processo histológico de rotina.
• Microtomo utilizado : Leika RM 2155
• Coloração dos cortes musculares com

-hematoxilina-eosina
-tricrômico de Masson
-e picro-sirius vermelho.

• Exame histológico foi realizado com um microscópio convencional (Olympus BH-2).
• Observação sob lâmpada polarizada
• Documentação fotográfica foi realizada com um microscópio Leika DMR acoplado a uma câmera digital Leika CD 300F e PC compatível.

• Os animais foram divididos em 6 caixas, de modo que as caixas de número 1 a 5 tinham 5 ratos e a caixa número 6 tinha 4 ratos 
• Todos os animais foram submetidos a uma avaliação da marcha por impressão plantar em papel especial, com imersão prévia dos membros posteriores em solução de sabão. 
• Caixa 1 continha o grupo controle, que recebeu a aplicação de 0,1 ml de solução salina ( NaCl 0,9%) no músculo pretibial direito. 

• Os animais das caixas 2 a 5 receberam 0,1 ml do Endopeels Original Main Product no mesmo músculo que o grupo controle.

• Caixa 6 foi constituída por 4 ratos, e cada um recebeu 0,5 ml do produto principal Endopeels original injectado na camada subcutânea. 

• Todos os animais foram submetidos à avaliação da marcha antes e depois de suas respectivas injeções.

1 mês após Injeção de Endopeel 0.1ml no músculo pretibial direito.
O que é visto em preto nas imagens não é uma necrose como alguns cientistas poderiam imaginar !
De fato, 4 conclusões têm de ser consideradas

• um artefato de coloração
• uma ausência de necrose
• uma apoptose
• um processo biorregenerativo 

3 meses (D90) após Injeção de Endopeel 0.1ml no músculo pretibial direito.

7 meses (D210) após Injeção IM de Endopeel 0.1ml no músculo pretibial direito.

Restitutio ad integrum completa após 7 meses

0,5 ml ( 5x 0,1ml)  Injeção SC de Endopeel na região pretibial subcutânea direita.