Skip to main content

Histoloji

Wistar sıçanları üzerinde

Ribeirão Preto Tıp Fakültesi Patoloji Bölümü Laboratuvarı'nın izniyle – USP

histoloji

01

Çalışma
Grubu

Deneyciler : R.Mené, M.Kim, A.Tenenbaum

N= 29 Wistar sıçanı
Ağırlık ortalaması : 421g

Hayvanların kaynağı : São Paulo Üniversitesi Ribeirão Preto Kampüsü Merkez Bioteryumu
Bakım : Ribeirão Preto Tıp Fakültesi Patoloji Anabilim Dalı Deneysel Patoloji Laboratuvarı (Lab of Pathology Department on Medicine School of Ribeirão Preto – USP)
Hayvanların barındırılması : polipropilen kutular
Hayvan yemi : laboratuvarın temel diyeti ve su
Işık koşulları : kontrollü temel koşullar altında doğal ışık/koyu döngüleri
Deneyciler : A.Tenenbaum, R.Mené, Kim

patoloji bölümü

02

Hayvanların eutanazisi ve histolojik örnekler

Konvansiyonel Mikroskopi

Fareler CO2 odalarında eutanize edildi.

  • 23 numara bistüri ile derinin kesilmesi
  • Metzenbaum makas ile pretibial kasın bulunması ve izole edilmesi
  • Tendonların Mayo makası ile kesilmesi.
  • Kas parçalarının mantar (kork) dilimlerine sabitlenmesi
  • Konvansiyonel optik mikroskop çalışması için %10 tamponlu formaldehit çözeltisinin %50'si ve %50 saf parafin kullanılarak gömme.
  • Kesitlerin rutin histolojik işlem olarak boyanması.
  • Mikrotom kullanıldı : Leika RM 2155
  • Kas dilimlerinin boyanması ile

-hematoksilin-eozin
-Masson’ın trichrome boyası
-ve kırmızı pikro-sirius.

  • Histolojik inceleme konvansiyonel bir mikroskop ile yapıldı (Olympus BH-2).
  • Polarize lamba altında gözlem
  • Fotoğrafik belgeleme Leika DMR mikroskobu ile Leika CD 300F dijital kamera ve uyumlu bir PC'ye bağlanarak gerçekleştirildi.
mikrotom

03

Materyal

6 sıçan/kutu
  • Hayvanlar 6 kutuya bölündü; 1'den 5'e kadar olan kutularda 5'er sıçan ve 6. kutuda 4 sıçan vardı 
  • Tüm hayvanlar özel kağıda alınan ayak izi ile yürüyüş değerlendirmesine ve arka bacakların önceden sabun çözeltisine daldırılmasına tabi tutuldu. 
  • Kutu 1 kontrol grubunu içeriyordu; sağ pretibial kasına 0,1 ml salin solüsyonu (NaCl %0,9) uygulandı. 
  • Kutu 2'den 5'e kadar olan farelere kontrol grubuyla aynı kasa 0,1 ml Endopeels Original Main Product uygulandı.

  • Kutu 6 4 sıçandan oluşuyordu ve her birine subkutan tabakaya 0,5 ml Endopeels original main product enjekte edildi. 

  • Tüm hayvanlar ilgili enjeksiyonlardan önce ve sonra yürüyüş değerlendirmesine tabi tutuldu.

sıçan kutuları

04

Yöntemler

Hayvanlar 10 gün-1 ay-3 ay-7 ay sonra eutanize edildi
eutanazi masası

05

Kontrol

NaCl %0,5 enjeksiyonundan sonra

Yorum : Salin solüsyon enjeksiyonundan sonra bildirilecek bir şey yok

tedavi yok

L:Pretibial-Tedavi yok

R:Pretibial-0,1 ml %0,9 NaCl IM sonrası

06

Endopeel Enjeksiyonundan 10 gün sonra

Kutu 2

Endopeel enjeksiyonundan 10 gün sonra sağ pretibial kasa 0,1 ml uygulandı.

Burada lenfositlerle çevrili vakuollerin oluşumunu görebilirsiniz. Vakuoller doku nekrozundan farklıdır . Lenfosit varlığı hücre zarlarının geçirgenliği ile ilişkilidir.

 

sol kontrol- 100xD10

L : Kontrol-100xD10

sağ 100xD10

R:100xD10

sağ200xx

R :200xD10

sağ400xxD10

R :400xD10

07

Endopeel Enjeksiyonundan 1 ay sonra

Kutu 3

Endopeel enjeksiyonundan 1 ay sonra sağ pretibial kasa 0,1 ml uygulandı.
Resimlerde siyah görülen şey, bazı bilim insanlarının düşünebileceği gibi bir nekroz değildir!
Aslında 4 sonuca dikkat edilmelidir

  • bir boyama artefaktı
  • nekrozun yokluğu
  • apoptoz
  • biyorejenatif bir süreç 
sol kontrol- 100xD30

L : Kontrol-100xD30

sağ 100x

R:100xD30

sağ400xxD30

R :400xD30

08

Endopeel Enjeksiyonundan 3 ay sonra

Kutu 4

Endopeel enjeksiyonundan 3 ay (D90) sonra sağ pretibial kasa 0,1 ml uygulandı.

sol kontrol- 100xD90

L : Kontrol-100xD90

sağ 100x

R:100xD90

09

Endopeel Enjeksiyonundan 7 ay sonra

Kutu 5

Endopeel IM enjeksiyonundan 7 ay (D210) sonra sağ pretibial kasa 0,1 ml uygulandı.

7 ay sonra tam iyileşme (restitutio ad integrum)

sol kontrol- 100xD210

L : Kontrol-100xD210

sağ 100x

R:100xD210

L Kontrol 50xD210

L :Kontrol 50xD210

R50X-D210

R50X-D210


10

Subkutan dokuya Endopeel enjeksiyonu

Kutu 6

0,5 ml ( 5x 0,1ml)  Endopeel SC enjeksiyonu sağ subkutan pretibial alana.

L:200x-Kontrol-SC

R-D10-SC-200X

R-D10-SC-200X

R-D30-SC-200X

R-D30-SC-200X

R-D90-SC-200X

R-D90-SC-200X

R-D210-SC-200X

R-D210-SC-200X

R-D210-SC-400X

R-D210-SC-400X


sonuçlar
    • Endopeel yaklaşık 1 aylık bir sürede seçici, geri dönüşümlü miyofibrolizis ve inflamatuar reaksiyon indükler
    • Kas değişiklikleri neredeyse tamamen geri dönüşümlüdür
    • Kas, Endopeel enjeksiyonu için etkinlik, kontrol ve etki süresi açısından daha iyi bir yerdir
    • Çalışma boyunca nekroz veya apse bulunamadı.

Jinekolojiye uygulanan diğer çalışma

Diğer Çalışma